试剂：
Buffer A/将6/7ml1M蔗糖、5ml1MTris/HCl、5ml1M***化钾、1ml1MEDTA和2ml10%BSA混合，制备100mL的Buffer A。调整pH至7/4。用ddH2O定容至100mL。
Buffer B：将25ml1M蔗糖、3ml0/1M EGTA/Tris和1ml1MTris/HCl混合，制备100mL的BufferB。调整pH至7/4。用ddH2O定容至100mL。
步骤：
1/用颈椎脱位法处死小鼠。使用手术刀，快速取出感兴趣的骨骼肌，放入小烧杯中，加入5毫升预冷的PBS，并补充10 mM EDTA。
2/用剪刀把肌肉切成小块，修剪可见的脂肪、韧带和结缔***。
3/用添加10 mM EDTA的预冷的PBS洗涤切碎的肌肉两次或三次。
4/将切碎的肌肉重新悬浮在5 ml含10 mM EDTA和0/05%胰蛋白酶的预冷的PBS中，持续30 min。
5/200g离心5 min，弃掉上清液。
6/ 用Buffer A中重新悬浮沉淀。
7/ 研磨肌肉使其均浆化。
8/ 将匀浆转移到50 mL离心管中，4°C，700g离心10 min。
9/ 将上清液转移到新的离心管中，4°C，8000g，离心10 min。
10/弃掉上清液，加入5 mL预冷的Buffer B。
11/8000g离心10 min。
12/弃掉上清液，重悬含有线粒体的沉淀。此步应避免添加Buffer B，并尝试用残留的少量缓冲液重悬线粒体，并且避免在再悬浮过程中形成气泡。
13/将线粒体悬浮液转移到一个新的离心管中，然后放在冰上。
14/使用双缩脲法测量线粒体浓度。
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