WEO啦

响应面法优化酶促脂肪酸甲酯化工艺条件
收录时间:2022-11-25 23:01:19  浏览:0
第 27 卷 增刊 2 农 业 工 程 学 报 Vol 27 Supp 2 2011年 12月 Transactions of the CSAE Dec 2011 125 响应面法优化酶促脂肪酸甲酯化工艺条件 张 豪 乙 引 洪 鲲 万晴姣 牛晓娟 贵州师范大学生命科学学院 贵阳 550001 摘 要 为了获得菜籽油脂肪酸酶促甲酯化合成生物柴油的最佳反应条件 首先采用 Plackett Burman 法对影响酯化率的 5 个因素进行筛选 发现酶质量分数 反应温度 摇***转速和反应时间 4 个因素显著影响酯化率 基于该 4 因素的最陡爬坡 试验 Box Behnken 设计及响应面分析结果表明 反应温度是影响酯化率的最显著因子 反应时间的作用效果相对较弱 反 应温度和摇***转速具有明显的互作效应 在优化条件下 醇 脂肪酸摩尔比 1 25 1 酶质量分数 11 5 g kg 脂肪酸 反应温 度 42 2 摇***转速 199 r min 反应 6 h 后 酯化率可达 95 67 与响应面拟和方程的预测值 96 52 吻合良好 关键词 脂肪酶 酯化 脂肪酸 诺维信 435 脂肪酶 响应面法 doi 10 3969 j issn 1002 6819 2011 z2 025 中图分类号 Q814 9 TQ645 TK6 文献标志码 A 文章编号 1002 6819 2011 Supp 2 0125 06 张 豪 乙 引 洪 鲲 等 响应面法优化酶促脂肪酸甲酯化工艺条件 J 农业工程学报 2011 27 增刊 2 125 130 Zhang Hao Yi Yin Hong Kun et al Optimization of lipase catalyzed methyl esterification of fatty acids by response surface method J Transactions of the CSAE 2011 27 Supp 2 125 130 in Chinese with English abstract 0 引 言 生物柴油即长链脂肪酸单酰酯 主要以***三酯或 脂肪酸为原料 与极性较好的低碳醇通过转酯或酯化反 应来生产 与传统的石化柴油有相近的燃烧特性 环保 可降解 是清洁的可再生能源 可作为石油产品的替代 品和战略石油资源储备 1 3 目前 生物柴油的工业化生 产方法主要是化学酸碱催化法 但普遍存在的问题是工 艺复杂 成本高 污染严重 而生物酶法催化的生物柴 油生产工艺具有反应条件温和 无污染 产物易回收等 优点 日益受到人们的重视 4 6 目前 有关酶法催化合成生物柴油的研究主要集中 在三酰*** 多为食用油 与短链醇的转酯反应上 5 7 10 对于脂肪酶催化脂肪酸与短链醇的酯化反应则鲜有报 道 中国每年产生数百万吨含有大量游离脂肪酸的高酸 值废油如各种皂脚酸化油和酸败严重的餐饮废油 11 这 些高酸值废油不适宜做食用油 也不适合作为传统碱催 化酯交换合成生物柴油的直接原料 因为油脂中大量的 游离脂肪酸和碱会形成皂 使得产率降低 12 13 因此 通常需要对这类低成本原料进行降酸预处理后才适于碱 催化合成生物柴油 14 17 这又加大了工艺的复杂性及生 产成本 相反 脂肪酶对原料油脂的品质 如酸值 含 收稿日期 2010 11 15 修订日期 2011 07 07 基金项目 贵州省科技计划项目 黔科合 NY 2006 3031 号 贵州省科技 创新人才团队建设项目 黔科合人才团队 2009 4007 号 作者简介 张 豪 1984 男 河南南阳人 研究方向 生化工艺学 贵阳 贵州师范大学生命科学学院 550001 Email zhanghao 0310 通信作者 乙 引 1967 男 重庆合川人 教授 主要从事植物生 物化学研究 贵阳 贵州师范大学生命科学学院 550001 Email yiyin 水量等 并无严格要求 18 因此 如何有效利用高酸值 废油脂通过酶法合成生物柴油具有重要的现实意义 本 研究以菜籽油脂肪酸和甲醇为原料 固相化脂酶 Novozym 435 为催化剂 采用响应面法对菜籽油脂肪酸的 甲酯化反应条件进行了优化 为进一步利用高酸值废油 酶法合成生物柴油提供基础数据 1 材料与方法 1 1 材料 固相化脂酶 Novozym 435 购自诺维信广州明远工 贸有限公司 菜籽油脂肪酸 实验室自制 KOH 甲 醇和乙醇均为市售分析纯 1 2 试验设计 1 2 1 Plackett Burman 试验设计 采用 Plackett Burman 两水平法对影响菜籽油脂肪酸 酯化的 5 种因素 另设 3 个虚构因素估计误差 进行考 察 筛选影响菜籽油酯化率的主效因素 试验因素水平 及编码见表 1 表 1 Plackett Burman 试验因素水平及编码 Table 1 Factors and levels of Plackett Burman experiment design 水平 因素 1 1 酶质量分数 x1 g kg 1 5 7 5 反应温度 x2 25 30 摇***转速 x3 r min 1 100 125 反应时间 x4 h 3 4 醇 脂肪酸摩尔比 x5 1 1 1 25 1 虚构因素 x6 虚构因素 x7 虚构因素 x8 农业工程学报 2011 年 126 1 2 2 最陡爬坡设计 根据 Plackett Burman 试验得出的多元一次拟合方程 安排最陡爬坡试验 拟合方程中 各变量的系数决定爬 坡方向和变化步长 如果系数为负 则该因素水平应为 递减 反之为递增 系数越大变化步长越小 1 2 3 响应面试验设计 根据 Box Behnken 中心组合设计原理 19 对 Plackett Burman 试验确定的主效因素和最陡爬坡试验确定的因素 水平的中心点 取三水平作相互作用 确定最优组合 试验因素水平及编码见表 2 表 2 Box Behnken 试验因素水平及编码 Table 2 Factors and levels of Box Behnken experiment design 水平 因素 1 0 1 酶质量分数 X1 g kg 1 10 5 11 11 5 反应温度 X2 42 44 46 摇***转速 X3 r min 1 185 195 205 反应时间 X4 h 5 5 5 75 6 1 3 菜籽油脂肪酸的制备 市售菜籽油经过皂化 盐析 酸化和脱水制得酸价 为 198 0 平均分子量为 283 3 的纯脂肪酸 1 4 菜籽油脂肪酸的酯化 试验设计条件下在 100 mL 锥形瓶中依次加入 20 g 菜籽油脂肪酸 甲醇和固相化脂酶 Novozym 435 混合 橡胶塞封口 在摇***中恒温振荡 反应结束后 取 1 2 mL 样品 离心 取上层油相水浴加热使油样中剩余的甲醇 挥发 ***后称取油样进行测定 1 5 分析测试 样品酸值的测定根据 GB T 5530 2005 取 0 5 1 g 样品 加入 20 mL 中性乙醇 95 和 3 滴酚酞指示剂 用 0 05 mol L KOH 滴定 AV0 V KOH c KOH 56 11 M 式中 AV0为样品酸值 即中和 1g 油脂中游离脂肪酸所 需氢氧化钾的毫克数 用 mg g 表示 V KOH 为滴定 消耗 KOH 标准溶液体积 mL c KOH 为 KOH 标准溶 液浓度 mol L 56 11 为 KOH 的摩尔质量 g moL M 为样品的质量 g 酯化率 1 AV0 198 0 100 2 结果与分析 2 1 影响菜籽油脂肪酶酯化重要影响因素的筛选 根据 1 2 1 Plackett Burman 试验设计 自变量编码和 因素水平见表 1 试验结果见表 3 利用 Minitab 软件对 Plackett Burman 试验结果进行分析 得到回归方程为 y 60 3 5 93x1 1 26x2 3 46x3 5 34x4 0 187x5 0 462x6 0 532x7 0 052x8 R2 0 989 RAdj2 0 982 1 式中 y 为菜籽油脂肪酸酯化率的预测值 x1 酶质量分 数 6 25 1 25 x2 反应温度 27 5 2 5 x3 摇***转速 112 5 12 5 x4 反应时间 3 5 0 5 x5 醇 脂肪酸摩尔 比 1 125 0 125 x6 x7和 x8为 3 各虚构因素 试验回归 系数显著性检验见表 4 表 3 Plackett Burman 设计及响应值表 Table 3 Plackett Burman experiment design matrix and esterification rate 序号x1 x2 x3 x4 x5 x6 x7 x8 酯化率 1 1 1 1 1 1 1 1 1 61 31 2 1 1 1 1 1 1 1 1 69 19 3 1 1 1 1 1 1 1 1 54 11 4 1 1 1 1 1 1 1 1 75 49 5 1 1 1 1 1 1 1 1 68 68 6 1 1 1 1 1 1 1 1 66 75 7 1 1 1 1 1 1 1 1 63 20 8 1 1 1 1 1 1 1 1 61 85 9 1 1 1 1 1 1 1 1 55 56 10 1 1 1 1 1 1 1 1 56 12 11 1 1 1 1 1 1 1 1 47 60 12 1 1 1 1 1 1 1 1 44 04 注 X6 X7 X8表示虚构变量 用以估计误差 表 4 Plackett Burman 试验回归系数显著性检验 Table 4 Significance test for regression coefficient of Plackett Burman experiment 模型项 回归系数标准误差 T 值 Prob Fa 常数项 60 3250 0 3402 177 32 0 001 酶质量分数 x1 5 9317 0 3402 17 44 0 001 反应温度 x2 1 2633 0 3402 3 71 0 034 摇***转速 x3 3 4600 0 3402 10 17 0 002 反应时间 x4 5 3367 0 3402 15 69 0 001 醇 脂肪酸比 x5 0 1867 0 3402 0 55 0 621 虚构变量 x6 0 4617 0 3402 1 36 0 268 虚构变量 x7 0 5317 0 3402 1 56 0 216 虚构变量 x8 0 0517 0 3402 0 15 0 889 注 a 表示 Prob F 值小于 0 05 表明模型或考察因素有显著影响 Prob F 值小于 0 01 表明影响高度显著 表 4 表明 对菜籽油脂肪酸酯化率影响显著的因素 有酶质量分数 反应温度 摇***转速和反应时间 忽略 虚构因素和不显著因素 通过逐步回归分析获得最优多 元一次回归模型为 y 60 33 5 93x1 5 34x2 3 46x3 1 26x4 R2 0 989 RAdj2 0 982 2 2 2 最陡爬坡试验设计 根据回归方程 2 中各显著因素系数的倍数关系及 Plackett Burman 试验各因素两水平之间的差值设计最陡 爬坡试验 表 5 回归方程 1 中非显著因素 x5 醇 脂肪酸比的系数为正 因此设置醇 脂肪酸比为 1 25 1 由表 5 可知 最优试验组合在处理 6 和处理 8 之间 故采用醇 脂肪酸比 1 25 1 酶质量分数 11 g kg 44 195 r min 连续反应 6 h 以处理 7 的条件为响应面试验因 素水平的中心点 增刊 2 张 豪等 响应面法优化酶促脂肪酸甲酯化工艺条件 127 表 5 最陡爬坡试验设计及试验结果 Table 5 Experinent design and results of steepest ascent path 编号 酶质量 分数 x1 g kg 1 反应 温度 x2 摇***转 速 x3 r min 1 反应时间 x4 h 酯化率 1 8 32 135 4 25 81 23 2 8 5 34 145 4 5 84 11 3 9 36 155 4 75 86 82 4 9 5 38 165 5 88 30 5 10 40 175 5 25 89 72 6 10 5 42 185 5 5 90 94 7 11 44 195 5 75 93 17 8 11 5 46 205 6 90 45 9 12 48 215 6 25 89 31 2 3 响应面法优化菜籽油脂肪酸酯化设计和分析 据 1 2 3 响应面试验设计 自变量编码和因素水平见 表 2 试验结果见表 6 表 6 响应面设计与结果 Table 6 Design and results of response surface analysis 编号 X1 X2 X3 X4 酯化率 1 1 1 0 0 92 84 2 1 1 0 0 94 99 3 1 1 0 0 89 68 4 1 1 0 0 90 14 5 0 0 1 1 87 37 6 0 0 1 1 93 58 7 0 0 1 1 87 63 8 0 0 1 1 94 65 9 1 0 0 1 92 55 10 1 0 0 1 94 58 11 1 0 0 1 95 18 12 1 0 0 1 95 49 13 0 1 1 0 91 39 14 0 1 1 0 83 70 15 0 1 1 0 94 31 16 0 1 1 0 92 88 17 1 0 1 0 84 83 18 1 0 1 0 88 30 19 1 0 1 0 93 02 20 1 0 1 0 95 46 21 0 1 0 1 93 62 22 0 1 0 1 88 84 23 0 1 0 1 94 82 24 0 1 0 1 87 57 25 0 0 0 0 93 17 26 0 0 0 0 93 95 27 0 0 0 0 94 49 利用 Minitab 软件对表 6 数据进行多元回归拟合 得 到响应值 Y 酯化率 对影响酯化率的关键因子酶质量分 数 X1 反应温度 X2 摇***转速 X3 和反应时间 X4 的二次多项式回归模型为 Y 93 8700 0 9050X1 2 4300X2 3 3900X3 0 4000X4 0 1117X12 1 6467X22 2 6042X32 0 2592X42 0 4225X1X2 0 2575X1X3 0 4300X1X4 1 5650X2X3 0 6175X2X4 0 2025X3X4 3 对模型 3 进行方差分析及回归系数显著性检验 结果见表 7 和表 8 表 7 Box Behnken 试验回归模型方差分析 Table 7 Variance analysis for regression model of Box Behnken experiment 变异来源***度 平方和 均方差 F 值 P 值 模型 14 281 820 20 1300 12 02 0 001 残差 12 20 099 1 6749 失拟 10 19 218 1 9218 4 36 0 201 误差 2 0 881 0 4404 总和 26 301 919 R2 0 933 RAdj2 0 856 表 8 Box Behnken 试验回归系数显著性检验 Table 8 Significance test for regression coefficient of Box Behnken experiment 模型项 回归系数 标准误差 T Prob Fa 常数项 92 2500 0 4280 215 530 0 001 X1 0 9967 0 2140 4 657 0 032 X2 3 0542 0 2140 14 271 0 001 X3 3 2150 0 2140 15 023 0 001 X4 0 2075 0 2140 0 970 0 305 X1X1 0 4742 0 3210 1 477 0 845 X2X2 1 0554 0 3210 3 288 0 012 X3X3 1 3392 0 3210 4 172 0 001 X4X4 0 0521 0 3210 0 162 0 652 X1X2 0 3750 0 3707 1 012 0 526 X1X3 0 2575 0 3707 0 695 0 698 X1X4 0 0275 0 3707 0 074 0 519 X2X3 1 0400 0 3707 2 806 0 032 X2X4 0 6175 0 3707 1 666 0 359 X3X4 0 2025 0 3707 0 546 0 760 注 a 表示 Prob F 值小于 0 05 表明模型或考察因素有显著影响 Prob F 值小于 0 01 表明影响高度显著 方差分析显著性检验结果表明 该模型 P 0 01 高度显著 失拟项 P 0 201 0 05 差异不显著 说明残 差由随机误差引起 R2 0 933 表明该模型与试验拟合较 好 自变量与响应值线性关系显著 可以用于菜籽油脂 肪酸酯化试验的理论预测 在 P 0 05 显著水平剔除不显 著项 得到优化方程为 Y 93 8700 0 9050X1 2 4300X2 3 3900X3 1 6467X22 2 6042X32 1 5650X2X3 4 2 4 响应面互作效应分析与优化 从回归系数的显著性检验可以看出 反应温度 X2 和 摇***转速 X3 的互作效应对菜籽油脂肪酸酯化率影响明 农业工程学报 2011 年 128 显 P 0 05 通过 Minitab 软件对其作响应曲面图和等高线 图 图1 从图1 可知 在所设计的试验条件范围内 反 应温度的降低和摇***转速的升高都可增加菜籽油脂肪酸酯 化率 二者交互作用表现为菜籽油脂肪酸酯化率的增大 图 1 反应温度和摇***转速交互影响菜籽油脂肪酸酯化率的曲 面图和等高线图 Fig 1 Response surface plot and contour plot of effects of X2 and X3 on esterification rate 进一步通过软件分析计算 得到菜籽油脂肪酸酯化 率预测值最大时的因素水平为 醇 脂肪酸比 1 25 1 酶 质量分数11 5 g kg 反应温度42 2 摇***转速199 r min 反应 6 h 后 预测值为 96 52 通过验证试验证实 在 预测条件下 酯化率平均值为 95 67 与理论值基本吻 合 表明模型是合理有效的 3 讨 论 通过对响应面试验获得的二次多项式回归方程的回 归系数显著性检验 表 8 进行分析 可以看出在各影响 因素中 反应温度 X2 和摇***转速 X3 对酯化率的影 响最显著 其次是酶质量分数 X1 而反应时间 X4 的影响相对较小 这可能是因为酶促反应的速率较大 在试验所设定的时间范围内 时间对酯化率的影响不是 非常明显 摇***转速和反应温度的交互作用显著 回归 方程 3 中 X2X3项的系数最大且为正数 说明转速和温 度的交互作用对反应起促进作用 而其他两两交互作用 皆不显著 在响应面法优化所得的条件下进行反应 所 测得的酯化率与预测值十分接近 可见该模型能较好的 预测固相化脂肪酶催化脂肪酸的甲酯化情况 参数准确 可靠 可用于实际操作 与三酰***一步转酯合成生物柴油的方法相比 通 过脂肪酸的酯化反应合成生物柴油具有 2 个优点 一是 短链醇与脂肪酸的互溶性要明显优于与三酰***的互溶 性 这在较大程度上避免了局部高浓度甲醇的产生 从而 减小短链醇对脂肪酶的抑制作用 10 20 在本试验中甲醇按 1 25 倍于脂肪酸的摩尔量一次性加入反应体系 6 h 后酯 化率达 95 7 说明脂肪酶未受到明显的抑制 二是不会 产生副产物*** 因此避免了***对酶的抑制作用 5 但 是利用脂肪酸直接酯化合成生物柴油也存在不足之处 第一 脂肪酸价格偏高 第二 一次酯化反应往往较难 获得高的酯化率 本试验中为 95 67 因为酯化反应 产物之一的水会抑制正向反应 因此 要真正实现原料 成本的降低和获得较高的酯化率 首先应考虑以高酸值 废油替代本试验中所使用的纯脂肪酸作为原料 其次设 法在反应过程中除去水则是进一步提高酯化率的关键 同时 由于高酸值废油自身含水率较高 且不同来源废 油的脂肪酸含量有差异 因此 在实际应用中首先应对 原料进行脱水预处理 而进一步优化反应条件对保证高 酯化率则是必要的 4 结 论 1 通过对 Plackett Burman 试验回归系数显著性分 析 发现对固相化脂肪酶 Novozym 435 催化的菜籽油脂 肪酸酯化反应影响显著的因素有酶质量分数 反应温度 摇***转速和反应时间 而醇 脂肪酸摩尔比在试验设定的 范围内影响不显著 2 通过对拟合二次方程中回归系数的显著性检验分 析 发现反应温度和摇***转速的互作效应对菜籽油脂肪 酸酯化率影响明显 3 通过 Box Behnken 设计及响应面分析获得的最 佳工艺参数为 醇 脂肪酸摩尔比 1 25 1 酶质量分数 11 5 g kg 反应温度 42 2 摇***转速 199 r min 在此条 件下反应 6 h 菜籽油脂肪酸酯化率为 96 52 实测值为 95 67 与理论预测值相比误差小于 1 参 考 文 献 1 汪勇 欧仕益 温勇 等 酶法催化合成生物柴油的研究 进展 J 中国油脂 2006 31 1 65 68 Wang Yong Ou Shiyi Wen Yong et al Development of research on synthesis of biodiesel by enzymatic catalysis J China Oils and Fats 2006 31 1 65 68 in Chinese with English abstract 2 颜培兵 王效华 生物柴油催化合成技术研究进展 J 农 业工程学报 2007 23 1 286 289 Yan Peibing Wang Xiaohua Research progress in catalytic transesterification during biodiesel production J Transactions of the CSAE 2007 23 1 286 289 in Chinese with English abstract 增刊 2 张 豪等 响应面法优化酶促脂肪酸甲酯化工艺条件 129 3 Bowman M Hilligoss D Rasmussen S et al Biodiesel A renewable and biodegradable fuel J Hydrocarbon Processing 2006 2 103 106 4 洪鲲 乙引 张习敏 等 生物柴油的双酯酶催化生产工 艺研究 J 中国油脂 2010 35 2 51 55 Hong Kun Yi Yin Zhang Ximin et al Two step lipase catalyzed processes for biodiesel production J China Oils and Fats 2010 35 2 51 55 in Chinese with English abstract 5 刘志强 李堂 黄朋 等 脂肪酶催化菜籽油制备生物柴 油工艺优化 J 农业工程学报 2007 23 12 203 207 Liu Zhiqiang Li Tang Huang Peng et al Optimization of the technological process for synthesizing biodiesel from lipase catalyzed rapeseed oil J Transactions o f the CSAE 2007 23 12 203 207 in Chinese with English abstract 6 高静 王芳 谭天伟 等 固定化脂肪酶催化废油合成生 物柴油 J 化工学报 2005 56 9 1727 1730 Gao Jing Wang Fang Tan Tianwei et al Synthesis of biodiesel from waste oil by immobilized lipase J Journal of Chemical Industry and Engineering China 2005 56 9 1727 1730 in Chinese with English abstract 7 徐桂转 岳建芝 张百良 等 脂肪酶连续催化桐油酯交 换反应制取生物柴油 J 农业工程学报 2010 26 7 245 249 Xu Guizhuan Yue Jianzhi Zhang Bailiang et al Enzymatic catalyzed transesterification reaction of tung oil to produce biodiesel continuously J Transactions of the CSAE 2010 26 7 245 249 in Chinese with English abstract 8 高静 邓利 王芳 等 响应面法优化脂肪酶催化废油脂 合成生物柴油工艺的研究 J 现代化工 2005 25 增刊 224 227 Gao Jing Deng Li Wang Fang et al Optimization of lipase catalyzed biodiesel from waste oil by response surface process J Modern Chemical Industry 2005 25 Supp 224 227 in Chinese with English abstract 9 刘汉灵 纪锡和 王孝英 响应面法优化 PB011 脂肪酶催 化大豆油合成生物柴油工艺 J 中国油脂 2008 33 6 48 51 Liu Hanling Ji Xihe Wang Xiaoying Optimization of PB011 lipase catalyzed synthesis of biodiesel from soybean oil by response surface method J China Oils and Fats 2008 33 6 48 51 in Chinese with English abstract 10 徐桂转 刘会丽 张百良 响应面法优化酶催化酯交换反 应研究 J 化学工程 2007 35 3 63 67 Xu Ghuizhuan Liu Huili Zhang Bailiang Optimization of lipase catalyzed transesterification by response surface methodology J Chemical Engineering China 2007 35 3 63 67 in Chinese with English abstract 11 彭红 刘玉环 阮榕生 废食用油生产生物柴油技术研究 进展 J 现代化工 2008 28 增刊 2 83 86 88 Peng Hong Liu Yuhuan Ruan Rongsheng Progress in biodiesel fuel production technology using waste cooking oil J Modern Chemical Industry 2008 28 Supp 2 83 86 88 in Chinese with English abstract 12 王红娜 马晓建 废油脂制备生物柴油的技术现状及前景 展望 J 粮油加工 2010 2 29 32 13 Canakci M Sanli H Biodiesel production from various feedstocks and their effects on the fuel properties J Journal of India Microbiol Biotechnology 2008 35 431 441 14 Wang Yong Ou Shiyi Liu Pengzhan et al Preparation of biodiesel from waste cooking oil via two step catalyzed process J Energy Conversion and Management 2007 48 1 184 188 15 Felizardo P Correia J N Raposo I et al Production of biodiesel from waste frying oils J Waste Manage 2006 26 487 494 16 曾庆梅 韩抒 张冬冬 等 高酸值米糠油酯化脱酸成生 物柴油原料 J 农业工程学报 2009 25 8 215 219 Zeng Qingmei Han Shu Zhang Dongdong et al Deacidification of high acid rice bran oil by esterification for the raw material of biodiesel J Transactions of the CSAE 2009 25 8 215 219 in Chinese with English abstract 17 王督 苏有勇 王华 等 碳基固体酸催化高酸值生物柴 油原料降酸效果 J 农业工程学报 2009 25 11 274 277 Wang Du Su Youyong Wang Hua et al Effects of reducing high acid of biodiesel feedstock with high acid value by carbon based solid acid J Transactions of the CSAE 2009 25 11 274 277 in Chinese with English abstract 18 Parawira W Biotechnological production of biodiesel fuel using biocatalysed transesterification A review J Critical Reviews in Biotechnology 2009 29 2 82 93 19 Montgomery D C Design and Analysis of Experiments M New York John Wiley and Sons 2001 427 450 20 盛梅 杨文伟 郭登峰 固定化脂肪酶催化合成生物柴油 J 应用化学 2005 22 7 788 791 Sheng Mei Yang Wenwei Guo Dengfeng Production of biodiesel fuel from rapeseed oil and methanol
温馨提示:
1. WEO啦仅展示《响应面法优化酶促脂肪酸甲酯化工艺条件》的部分公开内容,版权归原著者或相关公司所有。
2. 文档内容来源于互联网免费公开的渠道,若文档所含内容侵犯了您的版权或隐私,请通知我们立即删除。
3. 当前页面地址:https://www.weo.la/doc/7f924ead3332a4f3.html 复制内容请保留相关链接。